哪种方法最可靠地证实高压灭菌器确实杀灭了微生物？

解析

含耐热细菌芽孢的生物指示剂是唯一能证明灭菌条件足以杀灭微生物的方法，应按计划定期进行。指示胶带只能说明包裹接触过热，不能证明已达到灭菌。密封圈干净和可见蒸汽属于维护和运行观察，并非无菌的证据。